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冷凍型高通量組織研磨器處理蝙蝠、小鼠及蛙類組織的實驗方案

發(fā)布時間:2025-11-27 來源:新芝生物 瀏覽量:0
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  實驗背景:在從蝙蝠、小鼠及蛙類組織中獲得生物大分子,用于后續(xù)的病原體鑒定與功能基因組學(xué)分析。實驗采用新芝生物冷凍型高通量組織研磨器進行樣本前處理,以確保在低溫條件下快速、均一地破碎細(xì)胞,并有效防止生物分子降解,為精準(zhǔn)的下游分析奠定基礎(chǔ)。

  傳統(tǒng)研磨方法存在的痛點

  安全隱患與氣溶膠污染:動物組織樣本易產(chǎn)生攜帶病原體的氣溶膠,對實驗人員構(gòu)成暴露風(fēng)險,并可能導(dǎo)致樣本間交叉污染,尤其是蝙蝠等可能攜帶未知病毒的樣本。

  分子易降解:RNA、DNA及蛋白質(zhì)在研磨產(chǎn)熱或長時間處理下極易發(fā)生降解、變性,導(dǎo)致失活。

  生物分子易變性:樣品為蝙蝠、小鼠及蛙類組織,但長時間研磨產(chǎn)生的高溫,容易導(dǎo)致生物分子變性,影響活性。

  效率低下:手工研磨或普通設(shè)備研磨干豬皮耗時較長,不容易徹底研磨。

  實驗樣品:蝙蝠、小鼠及蛙類組織

  實驗?zāi)康?/strong>:驗證新芝生物冷凍型高通量組織研磨器通過深度冷凍與高頻振蕩研磨,能否有效應(yīng)對多種動物組織研磨的難題,在確保生物安全的同時,實現(xiàn)細(xì)胞的高效破碎與生物大分子的高質(zhì)量回收。

  實驗設(shè)備

SCINETZ-48L冷凍高通量研磨儀

高通量組織研磨器SCIENTZ-48L

  實驗耗材:2ml研磨管、6mm研磨珠2顆,3mm研磨珠3顆、800ul裂解液

  實驗步驟

  1. 樣本前準(zhǔn)備:稱取30mg組織樣本,迅速轉(zhuǎn)移至預(yù)冷的2ml研磨管中。根據(jù)組織韌性,加入1-2顆適量直徑的研磨珠。隨后,向管內(nèi)精確加入800μL相應(yīng)的裂解液。

  2. 參數(shù)設(shè)置:設(shè)置運行參數(shù)為:頻率70Hz,單次運行時間60秒,間歇暫停5秒,循環(huán)5次。同時,啟動設(shè)備的冷凍系統(tǒng),確保研磨在4℃ 的低溫環(huán)境下進行。

  3. 進行研磨:將適配器與樣本裝入研磨器,確保嚴(yán)格配平后鎖緊艙門,啟動程序。設(shè)備將自動執(zhí)行設(shè)定的間歇研磨程序。

  4. 結(jié)束取樣:建議在生物安全柜內(nèi)開啟研磨管,可獲得均質(zhì)、無氣泡的組織勻漿液。

  實驗結(jié)果

前后對比

左:研磨前;右:研磨后

  新芝生物冷凍型高通量組織研磨器處理后,蝙蝠、小鼠及蛙類的各類組織被研磨為細(xì)膩的細(xì)胞勻漿液,無可見組織塊殘留。應(yīng)用證明,獲得的核酸完整性好、蛋白質(zhì)活性高,滿足測序、病原PCR檢測及等分析的要求。

  注意事項

  1. 處理野生動物組織(尤其是蝙蝠)必須在相應(yīng)等級的生物安全柜中進行,操作人員需佩戴全套個人防護裝備。所有耗材均需作為生物危險廢物進行處理。

  2. 運行前必須確保適配器嚴(yán)格配平,以保證設(shè)備穩(wěn)定運行并避免損壞。

  3.樣品與研磨珠不宜過滿,需保留適當(dāng)研磨空間。

  4.開啟研磨罐時,應(yīng)在安全柜進行操作,防止吸入和交叉污染。

  5.設(shè)備維護:每次使用后清潔研磨腔,定期檢查電機振動平衡性。

  實驗表明,新芝生物冷凍型高通量組織研磨器為各類動物組織的前處理提供了理想方案。該設(shè)備有效解決了生物安全、分子降解和均質(zhì)化三大難題,顯著提升了工作效率與數(shù)據(jù)的可靠性,對相關(guān)科研工作具有重要價值。

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